<sub id="pbpbb"><dfn id="pbpbb"><mark id="pbpbb"></mark></dfn></sub>

      <sub id="pbpbb"><var id="pbpbb"><mark id="pbpbb"></mark></var></sub>

      <sub id="pbpbb"><var id="pbpbb"><mark id="pbpbb"></mark></var></sub>

      <thead id="pbpbb"><var id="pbpbb"><ins id="pbpbb"></ins></var></thead>

        <form id="pbpbb"></form>

          <sub id="pbpbb"><dfn id="pbpbb"><mark id="pbpbb"></mark></dfn></sub>
            <thead id="pbpbb"><var id="pbpbb"><ins id="pbpbb"></ins></var></thead>

            <sub id="pbpbb"><dfn id="pbpbb"></dfn></sub><address id="pbpbb"></address>
            <form id="pbpbb"></form>

              <address id="pbpbb"><listing id="pbpbb"></listing></address>

              <form id="pbpbb"></form>

                <address id="pbpbb"></address>
              產品中心 > PCR相關產品 > Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶(P1041-P1042-P1043-P1044)

              Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶(P1041-P1042-P1043-P1044)

              促銷: 494.00~24700.00

              分享

              運費 ¥0.00
              P1041(250U) P1042(1000U) P1043(3000U) P1044(18000U)

              Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶

              Cat. #P1041,P1042,P1043,P1044

              產品簡介

              東盛生物Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶是一種創新型的類抗體技術修飾熱啟動酶,該酶在室溫下活性被完全封閉,依賴溫度激活酶活性,可有效減少非特異性擴增,具有非常高的特異性。擴增片段長度可達5 kb(簡單模板)。延伸速率為2min/kb70-75℃,簡單模板可達20s/kb)。該酶具有5'→3'聚合酶活性,無3'→5'外切酶活性。擴增產物具有3'-dA末端。Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶采用先進的生產技術,動物源性DNA污染為零,穩定性更強,具有抗體法熱啟動酶不可比擬的優勢。同時,預變性時間縮短至3分鐘,工作效率比大多數化學修飾法熱啟動酶更高,是一款非常新穎、實用的產品。

              產品組成

              Component

              P1041

              250U

              P1042

              1,000U

              P1043

              3,000U

              P1044

              18,000U

              Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶(5U/μl

              50 μl

              200 μl

              200 μl × 3

              100 μl× 36

              10× Hotstart BufferMg2+ Plus[1]

              1.25 ml

              1.25 ml× 2

              1.25 ml × 6

              1.25 ml × 36

              6× Loading Buffer[2]

              1 ml

              1 ml

              1 ml

              -

              [1] 10× Hotstart Buffer分為Mg2+ PlusMg2+ Free兩種包裝,可方便選擇。如無特別說明提供Mg2+ Plus緩沖液。Mg2+ Free10× Hotstart Buffer提供25 mM MgCl2。

              [2] P1044不含6× Loading Buffer,如有需要請單獨購買(Cat. #M9041)。

              本產品不含dNTPs,如有需要請單獨購買(Cat. #P9011/P9012/P9013)。

              活性定義

              一個活性單位(U)指用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,在72℃、30 min內,攝入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

              保存條件

              -20℃保存2年。

              質量控制

              純度檢測:經質量檢測,產品不含脫氧核糖核酸內切酶、脫氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶污染。

              功能檢測:PCR方法檢測無宿主殘余DNA,能有效擴增人基因組中的單拷貝基因。

              應用舉例

              1. 配制反應體系

              請于冰上配置反應體系,體系大小與組分用量與添加順序可調整:

              Ordinal

              Component

              Volume

              (50 μl reaction volume)

              Final   concentration

              (50 μl reaction volume)

              1

              10× Hotstart BufferMg2+ Plus

              5 μl

              2

              dNTPs2.5mM

              4 μl

              0.4 mM

              3

              upstream primer (10 μM)[1]

              2 μl

              0.4 μM

              4

              downstream primer (10 μM)[1]

              2 μl

              0.4 μM

              5

              Optimus? Hotstart Taq   DNA聚合酶(5U/μl[2]

              0.5 μl-1 μl

              2.5U-5U

              6

              template DNA[3]

              1-4 μl

              <1μg

              7

              超純水[4]

              To 50 μl

              -

              optional

              MgCl2(MgSO4)/PCR Enhancer[5]

              Variable

              -

              [1] 引物終濃度建議范圍:0.1-1 μM。特異性差時可降低濃度,效率低時可提高濃度。

              [2] 根據目的片段擴增的難易程度調整DNA聚合酶的用量。

              [3] 不同模板最佳用量不同,部分DNA模板建議用量如下表(50 μl反應體系)。

              Template

              Dosage

              人類基因組DNA

              0.1μg-1μg

              λDNA

              0.5ng-5ng

              大腸桿菌基因組DNA

              10ng-100ng

              質粒DNA

              0.1ng-10ng

              [4] 可單獨訂購超純水(Cat. #P9021/P9022/P9023)。

              [5] 可單獨訂購25mM MgCl2Cat. #P9031)和PCR EnhancerCat. #P9041)。

              2. 設定反應程序進行PCR反應

              Stage

              Temperature

              Time

              Number of Cycles

              Initial Denaturation

              94℃

              3 min

              1

              Denaturation

              94℃

              30 sec

              25-35

              Annealing

              55-68℃[1]

              30 sec

              Extension

              72℃

              Variable[2]

              Final Extension

              72℃

              5-10 min

              1

              [1] 退火溫度應根據Tm值較低的引物來設。

              [2] 延伸時間按2min/kb來設最佳(簡單模板可達20s/kb)。

              3. 分析結果

              將產物與loading buffer混勻后進行瓊脂糖凝膠電泳,通過凝膠成像設備觀察目的條帶的擴增情況。如有需要,可進行割膠回收。

              無產物或產物量少的改進措施有:1調整退火溫度;2減少抑制劑的影響,如提取的基因組DNA中含有抑制擴增的成分,需要高倍稀釋(1: 10000)后使用;3采用乙醇沉降洗脫,提高模板DNA的純度;4使用PCR添加劑,如PCR EnhancerCat. #P9041、MgCl2Cat. #P9031等可提高產量。

              操作注意事項

              1 本產品采用改進的類抗體修飾技術,依賴溫度激活DNA聚合酶,能有效抑制非特異性結合,可在室溫下配置反應體系。

              2 Hotstart Taq DNA聚合酶具有脫氧核苷酸轉移酶活性,因此在PCR產物3'末端通常會加上1個多余的脫氧腺嘌呤核苷,可直接用于TA克隆。

              引物設計注意事項

              引物長度一般在15-30個堿基之間;上下游引物3’末端避免互補,避免出現3個以上重復的GC,或出現發夾結構,否則會產生非特異性擴增;GC含量控制在40-60%,且上下游引物GC含量盡量接近;Tm值控制在55-65℃之間,且上下游引物Tm值盡量接近,額外附加序列(酶切位點、修飾等)是非模板匹配序列,不參與Tm值計算。

              相關產品

              名稱

              貨號

              規格

              PCR Mix

              P2011/P2012/P2013/P2014/P2015

              1ml/5ml/10ml/50ml/100ml

              Power Green qPCR Mix

              P2101/P2102/P2103/P2104/P2105

              1ml/5ml/10ml/50ml/100ml

              1kb ladder

              M1181/M1182

              50/250

              DSTM5000

              M1111/M1112

              60/300

              高純度質粒小提試劑盒

              N1011/N1012/N1013

              50/100/200

              通用RNA提取試劑盒

              R1051

              50

              基因組DNA快速提取試劑盒

              N1111/N1112

              50/100

              DNA凝膠回收試劑盒

              N1071/N1072/N1073

              50/100/200

              RT-PCR Kit

              R1011/R1012

              20/100

              更多PCR酶、DNA Marker及核酸提純類產品請登錄東盛生物官網查詢。

               

               


              姓名
              電話號碼
              電子郵箱
              公司名稱
              地址
              留言*
               
              驗證碼
              提交
              欧美日韩亚洲囯产在线,国产亚洲日韩欧美看国产,国产亚洲日韩欧美看国产,天堂A亚洲欧美日韩国产综合